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微射流均質機|均質化技術對營養級納米脂質體包載高油酸棕櫚油物理穩定性的影響研究

微射流均質機|均質化技術對營養級納米脂質體包載高油酸棕櫚油物理穩定性的影響研究
諾澤流體科技  2025-08-11  |  閱讀:469

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一、介紹

本文隸屬于微射流均質機應用專題,全文共3800 字,閱讀大約需要 20 分鐘


摘要

本研究系統比較了微射流均質、超聲波和轉子-定子三種制備技術對高油酸棕櫚油(HOPO)納米脂質體物理穩定性的影響。結果表明,微射流均質技術制備的納米脂質體具有最優的物理穩定性,其平均粒徑最小(100.3±1.7 nm),多分散指數最低(0.13±0.01);超聲波技術制備的樣品則表現出最佳的膠體穩定性(Zeta電位-55.9±0.8 mV)。研究還發現HOPO的加入顯著提高了納米脂質體的儲存穩定性,在4℃條件下儲存35天后,含HOPO樣品的粒徑增長幅度較對照組降低40%。本研究為食品工業中功能性油脂的高效遞送提供了重要的技術參考


關鍵詞:

納米脂質體;微射流均質;高油酸棕櫚油;物理穩定性;Zeta電位;粒徑分布;響應面優化食品遞送系統


二、整體框架

本篇文章的整體框架如下所示:


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三、引言

高油酸棕櫚油(HOPO)作為一種富含生物活性成分的功能性油脂,其高含量的β-胡蘿卜素(可達500-700 mg/kg)和維生素E等天然抗氧化劑,不僅具有重要的營養功能,更能通過與磷脂分子的協同作用增強脂質體膜的穩定性。


當前納米脂質體的主要制備技術包括微射流均質、超聲波處理和轉子-定子分散等。其中,微射流均質技術憑借其高效的粒徑控制能力和良好的工藝重復性,在工業化生產中展現出獨特優勢;超聲波技術則以設備簡單、成本低廉見長;而轉子-定子技術則在處理高黏度體系時具有明顯優勢。然而,這三種技術在能耗效率、產品穩定性和活性成分保護等方面的比較研究仍顯不足。


基于此,本研究采用響應面法系統優化制備工藝參數,重點考察微射流均質、超聲波和轉子-定子三種技術對HOPO納米脂質體物理穩定性的影響規律。通過表征粒徑分布、Zeta電位和多分散性指數等關鍵指標,結合儲存穩定性實驗,建立工藝-結構-性能的構效關系,為功能性油脂納米載體的工業化應用提供理論依據和技術支持。


四、基本流程

粗脂質體制備

原料混合

  • 將大豆卵磷脂(含16%磷脂酰膽堿、14%磷脂酰乙醇胺、10%磷脂酰肌醇、34%甘油三酯)與高油酸棕櫚油(HOPO)按實驗設計比例混合。

水合過程

  • 溫度控制:35℃恒溫攪拌(1000 rpm,10 min)

  • 水相添加:緩慢加入Milli-Q純水

  • 初級均質:高速均質器(Ultra-Turrax T25,20,000 rpm,12 min)

  • 產物特征:形成多層囊泡(MLV),粒徑范圍1-5 μm


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微射流均質處理

將粗脂質體樣品在微射流均質機中以 75 μm Z 型交互腔進行處理;通過改變壓力(500–1500 bar)與循環次數(2–6 次)來調控粒徑。整個過程中使用冰水浴將懸浮液溫度控制在 < 35 °C。


超聲處理

取 80 mL 粗脂質體懸浮液置于 100 mL 燒杯中,使用  超聲波(1/2″探頭,20 kHz)按表 2 設計的“時間 (min)”與“振幅 (%)”進行超聲處理;冰水浴控溫 < 35 °C。


轉子-定子處理

將粗脂質體懸浮液連續循環通過轉子-定子系統,按表 2 的設計調節轉速(15000–25000 rpm)與處理時間(0.5–4 min);2 °C 水循環系統控溫 < 35 °C。


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五、結果與討論

1、均質技術對納米脂質體特性的影響

三種技術均能制備出粒徑 ≤ 200 nm 的納米脂質體。

  • 微射流(MF) 得到的粒徑最小且分布最集中(最低 100.3 nm,PdI = 0.13),可通過調節壓力與循環次數精準控制。

  • 超聲(US) 可將粒徑降至 149.2 nm,但 PdI 稍高(0.20),主要受超聲時間和振幅影響。

  • 轉子-定子(RS) 所得粒徑最大,最小為 163.6 nm,PdI 可達 0.25,受轉速與處理時間主導。

Zeta 電位穩定性:US(?55.9 mV)> RS(?51.6 mV)> MF(?46.6 mV)。

對所有技術建立 RSM 模型并進行方差分析(ANOVA)。僅保留 p < 0.05 的顯著模型;所有模型的 R2 均 > 0.90,且失擬項 p > 0.05,表明模型擬合良好、可用于預測。


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微射流均質對納米脂質體穩定性的影響

  • 粒徑:隨壓力和循環次數的增加而顯著減小;最高壓力(1500 bar)+ 6 次循環可得到 100.3 nm。油濃度升高會增大粒徑(長鏈油酸插入磷脂雙層),而卵磷脂濃度升高則使粒徑減小(形成更多囊泡)。

  • Zeta 電位:范圍為 ?32.1 ~ ?46.6 mV,處于高穩定區間。壓力與循環次數的增加會削弱電位,可能因氧化或空氣混入。提高油濃度可維持更負的電位,推測與其抗氧化成分協同卵磷脂有關。

  • PdI:0.13–0.28,均 < 0.3,表明體系高度均一;循環次數增加可明顯降低 PdI。


超聲波對納米脂質體穩定性的影響

  • 粒徑:隨超聲時間延長和振幅增大而減小;10 min、100 % 振幅下可獲得 149.2 nm。油濃度升高同樣增大粒徑。

  • Zeta 電位:整體在 ?32.4 ~ ?55.9 mV 之間,處于高穩定區。長時間超聲使電位絕對值減小,可能與空化產生的自由基促進磷脂水解/氧化有關。

  • PdI:隨超聲時間和振幅增加而降低;更長的處理時間和更高振幅帶來的強空化作用有助于粒徑均勻化。


轉子-定子因子對納米脂質體穩定性的影響

  • 粒徑:隨轉速和處理時間增加而減小;最高轉速(25000 rpm)+ 4 min 可將粒徑降至 163.6 nm。油濃度和卵磷脂濃度對粒徑的影響趨勢與上述兩種技術一致。

  • Zeta 電位:范圍 ?27.3 ~ ?51.6 mV,整體仍屬高穩定。

  • PdI:0.25–0.56,明顯高于前兩種技術,說明粒徑分布較寬;提高轉速和時間可在一定程度上改善均一性。


納米脂質體的優化及貯藏物理穩定性

通過 RSM 分別對三種技術進行二次優化:

  • 以粒徑、Zeta 電位絕對值和 PdI 最小化為目標;

  • 在此基礎上,進一步最大化 HOPO 載量以考察其對穩定性的影響。


將所得最優配方于 4 °C 貯藏 35 d,每 7 d 取樣測定粒徑、Zeta 電位及 PdI(表 6)。


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粒徑變化:

  • MF 與 US 制備的樣品在整個貯藏期內粒徑均 < 200 nm。

  • 高油載量 US 樣品的粒徑增幅最小(僅 2.7 %),而 RS 高油樣品增幅最大(15.2 %)。


Zeta 電位變化:

  • 高油載量 MF 樣品電位絕對值下降較大(18.9 %);US 與 RS 樣品下降幅度更小(≤ 26 %),表明高油濃度可在一定程度上提高電位穩定性。


PdI 變化:

  • MF 與 US 樣品的 PdI 仍 < 0.3,保持高度均一;RS 樣品在高油載量時 PdI 升至 0.35,分布趨于不均。


透射電鏡(TEM)觀察

最優條件下制備的納米脂質體呈球形單層囊泡結構,粒徑與 DLS 結果一致,進一步驗證三種技術均可獲得納米級脂質體


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MicrographinTEM:A.Microfluidization,B.Ultrasound,C.Rotor-Statorall theimagespresentsphericalgeometrieswiththepresenceofmonolayer lipo somes.


MF 與 US 最優脂質體中 β-胡蘿卜素的含量

β-胡蘿卜素易受熱降解。

HPLC 結果顯示: 粗脂質體懸浮液中 β-胡蘿卜素含量為 6.49 × 10?3 mg mL?1。 經微射流處理后保留率 92.9 %(下降 7.09 %); 經超聲處理后保留率 61.2 %(下降 38.83 %)。


表明微射流技術對 β-胡蘿卜素的破壞最小,可能與超聲局部瞬時高溫有關。


六、結論

采用響應面法(RSM)對三種均質技術——微射流(MF)、超聲(US)和轉子-定子(RS)——在包埋高油酸棕櫚油(HOPO)納米脂質體制備中的工藝與配方進行了系統優化。

  • 微射流技術 在所考察范圍內綜合表現最優,可獲得最小粒徑(≈ 100 nm)和最低多分散指數(PdI < 0.15),體系均一性最好。

  • 三種技術均能制備粒徑 < 200 nm 的納米脂質體,均符合“納米脂質體”定義。


通過優化 HOPO 載量發現,提高油含量可顯著提升脂質體在 4 °C、35 d 貯藏過程中的物理穩定性:

  • 微射流與超聲條件下,高油樣品的粒徑增長、Zeta 電位絕對值下降及 PdI 增幅均低于低油樣品。

  • 結果表明HOPO 中的抗氧化成分(如 β-胡蘿卜素)與磷脂雙分子層存在協同抗氧化作用,從而延緩脂質體聚集與氧化降解。


微射流均質處理整體解決方案

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參考文獻

[1]Juan David Beltrán, Ricaurte L , Estrada K B ,et al.Effect of homogenization methods on the physical stability of nutrition grade nanoliposomes used for encapsulating high oleic palm oil[J].LWT, 118[2025-08-09].DOI:10.1016/j.lwt.2019.108801.

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